亮點(diǎn)
·成本更低
·可更好地控制產(chǎn)品質(zhì)量，在后期工業(yè)化具備絕對(duì)優(yōu)勢(shì)
概述
·逆轉(zhuǎn)錄病毒（retrovirus），又稱為反轉(zhuǎn)錄病毒，是一類RNA病毒，其遺傳信息并非存儲(chǔ)在DNA上，而是在RNA上。不同于其他RNA病毒，逆轉(zhuǎn)錄病毒的RNA不進(jìn)行自我復(fù)制，進(jìn)入宿主細(xì)胞后，病毒內(nèi)核的逆轉(zhuǎn)錄酶將RNA轉(zhuǎn)錄成cDNA，進(jìn)而合成雙鏈DNA，整合酶將雙鏈DNA整合至宿主細(xì)胞染色體DNA上，從而將非病毒基因?qū)爰?xì)胞體內(nèi)，并可在體外進(jìn)行有絲分裂將其傳遞給子代細(xì)胞。逆轉(zhuǎn)錄病毒特異性感染分裂期細(xì)胞，如胚胎干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞、造血干細(xì)胞及血液內(nèi)的細(xì)胞等。在實(shí)際應(yīng)用中，逆轉(zhuǎn)錄病毒載體因其轉(zhuǎn)染范圍廣，轉(zhuǎn)染率高，常被用于細(xì)胞與基因治療。
·逆轉(zhuǎn)錄病毒載體（retroviral vector, RVV）是根據(jù)逆轉(zhuǎn)錄病毒的特性設(shè)計(jì)出的一種病毒表達(dá)載體。刪除了部分或者全部編碼病毒顆粒結(jié)構(gòu)蛋白的基因，只保留了病毒包裝轉(zhuǎn)導(dǎo)所必須的順式作用病毒序列，以留出更大空間插入外源基因及使病毒部分失活，這使其更易于大片段外源基因的包裝且安全性更高。為了使無復(fù)制能力的逆轉(zhuǎn)錄病毒質(zhì)粒產(chǎn)生有感染能力的病毒顆粒，深圳細(xì)胞谷使用的包裝細(xì)胞將提供gag、pol、env基因編碼的病毒結(jié)構(gòu)蛋白，僅需將攜帶外源基因單個(gè)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至包裝細(xì)胞株，通過兩步包裝法即可獲得穩(wěn)定逆轉(zhuǎn)錄病毒細(xì)胞株。通過借助表達(dá)逆轉(zhuǎn)錄病毒gag，pol外殼/逆轉(zhuǎn)錄酶和env包膜蛋白的包裝細(xì)胞株，產(chǎn)生具有感染能力但沒有病毒復(fù)制能力的假病毒顆粒。這種穩(wěn)定逆轉(zhuǎn)錄病毒細(xì)胞株能夠長(zhǎng)期生產(chǎn)逆轉(zhuǎn)錄病毒，具有更優(yōu)的批次間的穩(wěn)定性。還能通過單克隆篩選的方法進(jìn)一步提高逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的滴度，同時(shí)實(shí)現(xiàn)逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的工業(yè)化放大生產(chǎn)。
目前可量產(chǎn)的載體產(chǎn)品示例
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