慢病毒載體是在HIV-1基礎(chǔ)上改造而成的病毒載體系統(tǒng),可將外源基因或外源的shRNA有效地整合到宿主染色體上,從而達(dá)到持久性表達(dá)目的序列的效果。慢病毒已經(jīng)成為表達(dá)外源基因或外源shRNA的常用載體形式之一,并且正在獲得越來(lái)越廣泛的應(yīng)用。細(xì)胞谷可以提供針對(duì)多種腫瘤靶點(diǎn),如BCMA、CD19、CD38、CD22、EGFR/EGFRVIII 等,進(jìn)行慢病毒載體定制服務(wù)。
慢病毒載體(Lentivirus)是一類改造自人免疫缺陷病毒(HIV)的病毒載體,是逆轉(zhuǎn)錄病毒的一種,基因組是RNA,其毒性基因已經(jīng)被剔除并被外源性目的基因所取代,屬于假型病毒可將外源基因整合到基因組中實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定表達(dá),具有感染分裂期與非分裂期細(xì)胞的特性。
慢病毒基因組進(jìn)入細(xì)胞后,在細(xì)胞漿中反轉(zhuǎn)錄為DNA,形成DNA整合前復(fù)合體,進(jìn)入細(xì)胞核后,DNA整合到細(xì)胞基因組中。整合后的DNA轉(zhuǎn)錄成mRNA,回到細(xì)胞漿中,表達(dá)目的蛋白或產(chǎn)生小RNA。慢病毒介導(dǎo)的基因表達(dá)或小RNA干擾作用持續(xù)且穩(wěn)定,并隨細(xì)胞基因組的分裂而分裂(圖1)。
圖1 慢病毒包裝和侵染細(xì)胞的過(guò)程
慢病毒載體具有宿主范圍廣,免疫原性低,基因容量大,可以長(zhǎng)期表達(dá)等特點(diǎn)。能夠有效地感染培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞、肝細(xì)胞、心肌細(xì)胞、神經(jīng)元、內(nèi)皮細(xì)胞、干細(xì)胞等多種類型的細(xì)胞。
慢病毒的感染具有整合特性,能夠?qū)⑼庠椿蛴行У卣系剿拗魅旧w上,達(dá)到持久性表達(dá),因而可構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞株,用于基因的細(xì)胞功能研究。借助慢病毒載體改造T細(xì)胞可用于CAR-T細(xì)胞治療。
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